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Nature子刊将DNA测序精度提高1000倍

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发表于 2019-11-10 07:26 | 显示全部楼层 |阅读模式

来自瑞士洛桑联邦理工学院(EPFL)的科学家们开发出了一种方法,将DNA测序的精度提高了1000倍。利用纳米孔来读取单个核苷酸,这一方法为更好及更廉价的DNA测序铺平了道路。最初的DMEM培养基配方含有1000mg/L的葡萄糖,并首次报道用于培养小鼠胚胎细胞。






DNA测序是一种能够确定DNA分子准确序列的技术。作为当前最重要的生物及医学工具之一,它构成了基因组分析的核心。通过辨认基因的确切组成,科学家们可以检测出突变,甚至识别出不同的生物体。





一种强大的DNA测序方法利用了微小的纳米孔来读取通过的DNA。然而,由于DNA往往以极快的速度通过纳米孔,“纳米孔测序”错误率非常的高。EPFL的科学家们现在发现了一种粘性液体可以让这一过程的速度减慢1000倍,大大提高了这一方法的分辨率和精度。这一突破性成果发布在《自然纳米技术》(NN)杂志上。





读取速度过快


DNA是由4种不同的重复构件组成的长分子。这些称作为“核苷酸”的构件按各种组合串在一起,其中包含着了细胞的遗传信息,如基因。基本上,这4种核苷酸构成了所有的遗传语言。DNA测序就是通过设法译解这一语言,将其分解为单个的碱基。





了解SMRT测序技术的最新进展


在纳米孔测序过程中,DNA就像线穿过针一样地通过膜中的微小孔道。这一孔道中包含有电流,当每个核苷酸通过这一孔道时,它们会以各自的方式阻止电流,由此可以识别出这些核苷酸。尽管这种方法很强大,但它却受到高速度的困扰:DNA通过孔道的速度过快,使得无法以足够的精度来读取它。





放慢速度





EPFL生物工程研究所AR实验室现在利用一种粘性液体将DNA通过的速度减慢了2-3个数量级,攻克了这一问题。由此,将测序精度提高至单核苷酸。





这项研究是由冯建东(JF,音译)、刘科(KL,音译)与AK实验室的同事们共同完成。两位研究人员开发出了一种由二硫化钼(MS2)构成的、厚度仅为07的膜。研究小组随后在膜上制造出了大约3宽的纳米孔。





接下来是将DNA溶解在包含带电离子的粘液中,研究人员可以微调粘液的分子结构来改变它的“粘度梯度”。这一液体属于一种“室温离子液体”,其实际上是一种盐溶液。EPFL的科学家利用了液体的可调性,将其达到了一种足以减慢DNA的理想粘度梯度。





最后,研究小组通过让溶解在液体中的已知核苷酸多次通过纳米孔测试了他们的系统。这使得研究人员能够获得每个核苷酸的平均读值,然后利用读值来鉴别出它们。





尽管仍处于测试阶段,研究小组打算继续他们的研究工作来测试完整的DNA链。冯建东说:“我们正在寻找机会商业化这一技术。”





科学家们预测,利用高端电子产品及控制液体的粘度梯度还可以进一步优化这一系统。通过结合离子液体及二硫化钼薄膜纳米孔,他们希望构建出能获得更好输出结果的、更廉价的DNA测序平台。





这项工作提供了一种创新的方法改进当前最好的一种DNA测序技术。“在未来的数年里,测序技术将肯定会从研究转向临床。因此,我们需要快速及价格实惠的DNA测序——纳米孔技术可以实现这一目标,”AR说。
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